Podaj swój adres e-mail

Badania

ESTER-C® [3. PODSUMOWANIE BADAŃ DOTYCZĄCYCH ESTER-C®]




ESTER-C® [Askorbinian/treonian wapnia] i logo ESTER-C® są zastrzeżonymi znakami towarowymi The Ester-C® Company. U.S Patent 4,822,816 i 5,070,085 i odpowiadające patenty zagraniczne.



3. PODSUMOWANIE BADAŃ DOTYCZĄCYCH ESTER-C®

Ester C® Company


WPROWADZENIE

W siedzibie Ester C® Company nieustannie szukamy nowatorskich sposobów na dowiedzenie się, w jaki sposób nasz produkt przynosi korzyści ludzkiemu ciału. Tradycyjne metody badań naukowych obejmują zarówno badania in vitro, jak i in vivo. Zalety badań in vitro, które przeprowadzane są na kulturach komórek a nie na żywych zwierzętach czy ludziach, są liczne. Dzięki nim można uzyskać znacznie więcej informacji w stosunkowo krótkim okresie czasu, ponieważ eksperymenty te mogą być szybko ukończone. Przykładowo, pewien nutraceutyk (żywność lecznicza) mógłby wykazywać działanie hamujące wzrost wyhodowanych komórek rakowych. Wadą takich badań jest to, że nie ma sposobu na wykazanie takiego samego wpływu na człowieka, ponieważ w badaniu ominięte zostały kwestie wchłaniania, dystrybucji, metabolizmu i wydalania. Możliwe jest również wystawienie wyhodowanych komórek na znacznie wyższe stężenie danego preparatu niż to, jakie osiągnięto by przy doustnym jego podaniu. Badania in vivo, które przeprowadzane są na żywych organizmach zwierząt i ludzi, są znacznie bardziej dokładniejsze, jednakże są droższe i trwają dłużej. Rozwinięte testy kliniczne na ludziach mogą zabierać kilka lat i miliony dolarów, zanim zostaną ukończone. Udane badania in vitro zwykle poprzedzają badania z udziałem ludzi.

Jedną z nowych technologii, która staje się dostępna dla celów badań naukowych, jest tak zwana „technologia ekspresji genów”. Celem jest zobaczenie, jak produkty wpływają na ludzi na poziomie genetycznym; innymi słowy, zobaczenie, które geny zostały stymulowane (uległy nadekspresji) bądź zahamowane (transkrypcja uległa obniżeniu) wskutek działania produktu. W celu zbadania wpływu produktu na geny wykorzystuje się dwie techniki. Jednakże przed ich opisaniem pomocne będzie krótkie pomówienie o genach. Nasze geny utworzone są z nici kwasu dezoksyrybonukleinowego (DNA). DNA składa się z unikalnych sekwencji poszczególnych kwasów nukleinowych. Ta unikalna sekwencja ”koduje” jedyne w swoim rodzaju RNA (kwas rybonukleinowy), który „koduje” określone białka. Białka te pełnią liczne funkcje w organizmie; nauka na temat ekspresji białek i tego, jak wpływają one na funkcje fizjologiczne ciała, zwana jest proteomiką.

Jak wspomniano wcześniej, istnieją dwie główne techniki wykorzystywane do badania ekspresji genów, które pokrótce zostaną omówione w tym artykule. Pierwsza metoda wykorzystuje mikromacierze DNA. Jest to raczej metoda „uderzeniowa” w badaniach nad genami, ponieważ w pojedynczym eksperymencie można badać 5000-10000 genów lub nawet więcej. Druga metoda wykorzystuje reakcję łańcuchową polimerazy (ang. PCR – polymerase chain reaction). Jeśli badacz zna geny, które mogą być modulowane przez produkt, wtedy wykorzystuje się bardziej ukierunkowane podejście, jakim jest technologia PCR. W przeciwieństwie do mikromacierzy DNA reakcja PCR z analizą przyrostu ilości produktu w czasie rzeczywistym (ang. Real-Time quantitative PCR) pozwala na pomiar ilościowy ekspresji genu i poznanie stopnia nadekspresji bądź zahamowania transkrypcji. Komórki wystawione są zarówno na testowany produkt lub na produkt kontrolny. Po upłynięciu odpowiedniej ilości czasu z komórek uzyskuje się RNA. Jeżeli doszło do nadekspresji docelowych genów, będzie można zaobserwować więcej kopii stosownego RNA. Następnie, dzięki wyszukanym metodom (poprzez odwrotną transkrypcję do cDNA i amplifikację przez PCR) będzie można policzyć odpowiednią liczbę kopii RNA dla produktu badanego i kontrolnego. Obecnie wykorzystujemy te zaawansowane techniki do badania wpływu Ester-C® na geny, które modulują układ odpornościowy. Te nowe techniki, w połączeniu z tradycyjnymi badaniami in vitro oraz in vivo, pozwalają na odkrywanie, w jaki sposób Ester-C® wpływa na zachowanie dobrego zdrowia.


Absorpcja i retencja Ester-C®

Witamina C (kwas l-askorbinowy) pełni znaczącą rolę w ponad 300 procesach zachodzących w organizmie. Gwałtowny absorpcja komórkowa i opóźnione wydalanie nerkowe kwasu askorbinowego sprzyja utrzymaniu optymalnej koncentracji w komórkach, który wykorzystywany jest w procesach biochemicznych. Przeprowadzono kilka badań mających zweryfikować hipotezę, jakoby unikalna kompozycja Ester-C® czyniła go łatwiej przyswajalnym i sprawiała, że jest on wolniej wydalany z organizmu w porównaniu do witaminy w postaci pojedynczego kwasu lub soli.

W badaniu przeprowadzonym na Uniwersytecie Mississippi (School of Pharmacy) dwóm grupom szczurów podawano Ester-C® oraz kwas l-askorbinowy. Pobrano próbki krwi w 20, 40, 80, 160 i 240 minucie trwania eksperymentu i zanalizowano je pod kątem kwasu askorbinowego. Pod tym samym kątem zbadano także mocz, jak tylko pojawił się w miseczkach zbiorczych.

Koncentracja kwasu askorbinowego w osoczu była wyższa w 20, 40 i 80 minucie u szczurów, którym podawano Ester-C® w porównaniu do szczurów otrzymujących kwas l-askorbinowy. Kwas askorbinowy został wykryty dwukrotnie wcześniej w moczu zwierząt, którym podano kwas l-askorbinowy w porównaniu do zwierząt otrzymujących Ester-C®. Mniej gwałtowne wydalanie, zbieżne z wyższą koncentracją kwasu askorbinowego w osoczu, jest zgodne z hipotezą, że Ester-C® zapewnia lepszą koncentrację w komórkach do celów optymalnej aktywności biochemicznej.

Wyniki tego badania sugerują, że Ester-C® może korzystniej zwiększać koncentrację krążącego w organizmie kwasu askorbinowego oraz sprzyjać szybkiemu wysyceniu tkanek.

Badanie dotyczące biodostępności preparatu u ludzi obejmowało trzy grupy mężczyzn, którzy przebywali na diecie wyłączającej cytrusy, zielone warzywa liściaste oraz suplementację witaminami na tydzień przed rozpoczęciem eksperymentu. Na początku badania pobrano próbki krwi od każdego z uczestników w celu określenia poziomu askorbinianu w osoczu i białych ciałkach krwi. 

Grupy przyjmowały:

A. ESTER-C® 4000 mg/dziennie (równoważnik 3000 mg kwasu askorbinowego),
B. kwas l-askorbinowy 3000 mg/dziennie,
C. kwas cytrynowy 3000 mg/dziennie.

Po przyjęciu ww. pobrane zostały próbki krwi po 0, 4, 8 i 24 godzinach. Określony został poziom askorbinianu w surowicy krwi i białych ciałkach krwi. Pobrano również próbki moczu z 24 h w celu określenia poziomu askorbinianu i szczawianu. Po 2-6 dniach okresu „wypłukania” uczestnikom badania zmieniono podawany preparat.

Każda grupa otrzymywała te same dawki. Od każdej grupy pobrano próbki krwi i moczu w identycznym schemacie jak poprzedni. Grupy przyjmujące askorbinian i Ester-C® kontynuowały suplementację przez 7-10 dni. Pod koniec tych okresów pobrane zostały próbki krwi na czczo oraz próbki moczu z 24 h. 

Wyniki porównujące grupę Ester-C do grupy przyjmującej kwas l-askorbinowy wykazały:
poziom Ester-C® w osoczu był znacznie wyższy w porównaniu do kwasu l-askorbinowego w 4, 8 i 24 godzinie po przyjęciu, jak również po 7-10 dniach suplementacji.
poziom Ester-C® w białych ciałkach krwi był znacznie wyższy w porównaniu do kwasu l-askorbinowego askorbinowego w 8 i 24 godzinie po przyjęciu, jak również po 7-10 dniach suplementacji.
 Ester-C® powiązany został ze znacząco mniejszym wydalaniem szczawianu w ciągu pierwszych 24 h po przyjęciu suplementu, jak również po 7-10 dniach suplementacji.
Ester-C® powiązany został ze znacząco mniejszą utratą askorbinianu w ciągu pierwszych 24 h po przyjęciu suplementu, jak również po 7-10 dniach suplementacji.


Metabolity w Ester-C®

Metabolizm witaminy C obejmuje utlenianie kwasu askorbinowego do kwasu dehydroaskorbinowego. Następnie dochodzi do wytworzenia kwasów aldonowych - kwasu lyksonowego, ksylonowego i treonowego. Kilka badań pokazało, że metabolity te mogą być najprawdopodobniej odpowiedzialne za szybką absorpcję i retencję w organizmie.  W jednym z takich eksperymentów zbadano wpływ l-treonianu wapnia, głównego the major calcium aldonate found in Ester-C®.

Badanie przeprowadzono wykorzystując ludzkie T-komórkowe chłoniaki skóry. W badaniach komórki były pozbawione osocza w celu zmniejszenia poziomu białek w nim krążących takich jak insulina, które stymulują przyjmowanie kwasu askorbinowego na poziomie komórkowym. Następnie komórki zostały zawieszone w 1,0 ml l-treoninianu wapnia o zmiennej koncentracji; dodano także kwas L-[1-14C]-askorbinowy do kwasu askorbinowego o koncentracji wynoszącej około 1,25 mg%.

Wyniki przedstawione w Tabeli 1 pokazują, że l-treoninian wapnia zwiększył komórkową akumulację kwasu askorbinowego, a najwyższa dawka podniosła wychwyt o 177% ponad wartości kontrolne. Podobne badanie z kwasem winowym, czyli kwasem aldonowym nie pochodzącym z metabolizmu kwasu askorbinowego, nie wykazało zwiększonego wychwytu kwasu askorbinowego (nieopublikowane dane tych samych autorów).

Tabela 1

Treoninian Ca mg%  Komórki DPM/106  % Wzrostu 
0 (control)  1,662 ± 83 0 
100  2,302 ± 199  +39 
500  2,915 ± 130  +75 
750  4,177 ± 567  +151 
1,000  4,610 ± 597  +177 

Dalszy eksperyment, wykorzystujący mysie fibroblasty 3T3 oraz ludzkie T-komórkowe chłoniaki, badał wpływ kwasu l-treonowego i l-lyksonowego na absorpcję kwasu askorbinowego. Badanie obejmowało również wpływ chlorku potasu, kwasu l-winowego, uabainy (strofantyny G) oraz 2,4-dinitrofenolu na absorpcję kwasu askorbinowego. Wyniki przedstawiają się następująco:

• L-treoninian wapnia zwiększył absorpcję kwasu askorbinowego przez fibroblasty w sposób zależny od dawki, ze znaczącymi dawkami w wysokości 23 oraz 30,5 mM.
• Sól potasowa kwasu l-lyksonowego w dawce 30,5 mM przyczyniła się do 23% wzrostu absorpcji kwasu askorbinowego przez fibroblasty. (Efekt ten nie wystąpił dzięki obecności jonów potasu, ponieważ stosunek absorpcji był znacznie wyższy niż w przypadku chlorku potasu).
• Wystąpił znaczący spadek w absorpcji kwasu askorbinowego, gdy obecny był kwas winowy.
• Uabaina (strofantyna G) i 2,4-dinitrofenol znacząco zmniejszyły absorpcję kwasu askorbinowego przez T-komórkowe chłoniaki i uniemożliwiły L-treonianowi wapnia zwiększanie absorpcji kwasu askorbinowego; substancje te nie wpłynęły znacząco na absorpcję, ani też nie zahamowały zdolności l-treoninianu wapnia do zwiększania absorpcji w fibroblastach.

Rezultaty te wskazują na pewną specyficzność treonianu i lyksonianu w kategoriach absorpcji kwasu askorbinowego; sugerują one również, iż kwasy te mogą posiadać modulacyjny wpływ na transport kwasu askorbinowego.

W celu sprawdzenia teorii, jakoby metabolity obecne w Ester-C® umożliwiały aktywność kwasu askorbinowego w organizmie, przeprowadzono kolejne testy. Badanie odbyły się na szczurach niesyntetyzujących askorbinianu.  Dwóm grupom szczurów, początkowo przebywającym na diecie ze śladowymi ilościami kwasu askorbinowego, podawano albo kwas askorbinowy, albo Ester-C® rozpuszczone w destylowanej wodzie. Po 24 dniach zaobserwowano następujące fakty:

• Grupa przyjmująca Ester-C® miała znacznie większy wzrost masy ciała  – 125% w porównaniu do 46% wzrostu w grupie przyjmującej kwas askorbinowy.
• Wystąpiła wysoka współzależność pomiędzy aktywnością odpowiedników askorbinianu a wzrostem masy ciała, kiedy odpowiednikiem askorbinianu był Ester-C®.
• Grupa przyjmująca kwas askorbinowy miała znacznie wyższe noty w punktowym systemie oceny podatności na występowanie szkorbutu niż grupa Ester-C®.
• Dwa szczury z grupy przyjmującej kwas askorbinowy były tak chore w dniu 24, że spodziewano się ich zdechnięcia z powodu szkorbutu w ciągu 1-2 dni. W grupie Ester-C® nie odnotowano zachorowalności.


Komórkowa akumulacja Ester-C®

Zasugerowano, że poziom witaminy C w osoczu odzwierciedla jedynie witaminę w trakcie transportu do komórek docelowych. Stąd też, badania dotyczące akumulacji komórkowej i funkcji biochemicznych są istotne w celu zinterpretowania zalet, jakie oferują inne formy witaminy C. Ostatnio na Uniwersytecie Kalifornijskim w Los Angeles przeprowadzono badanie na ludziach (dotychczas nie zostało jeszcze opublikowane), mające na celu określenie poziomu witaminy C w białych krwinkach po doustnym przyjęciu kwasu askorbinowego, placebo i dwóch preparatów Ester-C®.
15 osób podzielono losowo na trzy grupy, które miały brać udział w podwójnie ślepej krzyżowej próbie. Po początkowym okresie przebywania na diecie ubogiej w witaminę C, każdy z uczestników eksperymentu losowo otrzymał jeden z trzech preparatów witaminy C lub placebo, oddzielonych okresami „wypłukania”. Pobrano próbki krwi w 0, 1, 2, 3, 4, 8 oraz 24 godzinie po każdym przyjęciu preparatu. Otrzymano następujące rezultaty:

• Dwa preparaty Ester-C® przyczyniły się do dłuższej retencji witaminy C w białych krwinkach w porównaniu do kwasu askorbinowego; dłuższe zatrzymanie preparatów było widoczne 24 h po ich administracji. 
• Niższy poziom witaminy C w białych krwinkach zaobserwowano u palaczy, wykazując jednocześnie gwałtowniejszy spadek jej poziomu w porównaniu do osób niepalących tytoniu. Palacze utrzymywali znacząco wyższy poziom witaminy C w białych krwinkach po przyjęciu preparatów Ester-C®.


Ester-C® a odporność

Badanie wykorzystujące wysoce precyzyjną analizę ekspresji genów, która opracowana została przez Source Precision Medicine, umożliwiło odkrycie zmian w ekspresji wybranych genów immunomodulujących w odpowiedzi na Ester-C®.

Wykorzystując pojedynczego dawce ludzkiego metodą in vitro oszacowano ilość Ester-C® we krwi pełnej poddanej i nie poddanej zewnętrznym bodźcom. Zaobserwowano, że Ester-C® stymulował kluczowe geny immunomodulujące w sposób zależny od koncentracji (6,25, 12,5, 25, 50, 100 oraz 200 ug/ml) w nie poddanej działaniu leków krwi pełnej. Przykładowo, Ester-C® aktywował zależnie od koncentracji (3 do 10-krotnie) IL1RN, gen odgrywający istotną rolę w regulowaniu odpowiedzi immunologicznej. 

Co więcej, odkryto, że Ester-C® zwiększa odpowiedź krwi pełnej na dwa kluczowe bodźce zapalne i immunologiczne – endotoksynę bakteryjną (LPS, lipopolisacharyd) oraz cytokinę IL1B. CXCL2, IL10, IL1A oraz PLAU zostały szczególnie zmodulowane w sposób zależny od koncentracji. Przy dawce 200 ug/mL (odpowiednik 1 g dawki u człowieka) Ester-C® blokował indukcję IL10 przez LPS o >90% oraz zwiększał odpowiedź CXCL2, IL1A i PLAU >6-krotnie. (LPS jest silnym aktywatorem wrodzonych odpowiedzi immunologicznych; poza tym w ludzkiej krwi stymuluje on szeroką odpowiedź zapalną/immunologiczną. IL1B zaangażowana jest w różne odpowiedzi zapalne i immunologiczne, włączając odpowiedzi na infekcje.)

Ostatecznie, wstępne badanie in vivo przeprowadzone na jednym ochotniku wykazało odpowiedź krwi pełnej w drugiej i czwartej godzinie po doustnym przyjęciu pojedynczej dawki Ester-C®. Razem, dane te pomagają zdefiniować in-vitro oraz ex-vivo stan dynamiczny krwi pełnej u człowieka w odpowiedzi na Ester-C®. Potencjalne współzależności pomiędzy owymi stanami dynamicznymi stanowią podstawę do dalszych badań.

Źródło:
1) Bush, Marilyn J. and Verlangieri, Anthony J. (1987). An Acute Study on the Relative Gastro- Intestinal Absorption of a Novel Form of Calcium Ascorbate. Research Communication in Chemical Pathology and Pharmacology 57 (1).
2) Wright, Jonathan V, M.D. and Suen, Raymond M. (1990). Comparative Studies of “Ester C” Versus L-Ascorbic Acid. International Clinical Nutrition Review 10 (1).
3) Fay, Michael J. and Verlangieri, Anthony J. (1991). Stimulatory Action of Calcium L-Threonate on Ascorbic Acid Uptake by a Human T-Lymphoma Cell Line. Life Sciences 49 1377-1381.
4) Fay, Michael J. et al. (1994). Effect of Aldonic Acids on the Uptake of Ascorbic Acid by 3T3 Mouse Fibroblasts and Human T Lymphoma Cells. Gen. Pharmac. 25 (7) 1465 –1469.
5) Verlangieri, Anthony J. et al. (1991). Comparison of the Anti-Scorbutic Activity of L-Ascorbic Acid and Ester-C in the Non-Ascorbate Synthesizing Osteogenic Disorder Shionogi (ODS) Rat. Life Sciences 48 2275-2281.
6) Bernal, Samuel et al. Vitamin C Uptake in White Blood Cells in Vivo (unpublished).
7) Ester-C Form of Vitamin C Modulates the In-Vitro Response of Human Whole Blood to Two Key Inflammatory and Immunological Stimuli


Ostrzeżenie:
To opracowanie jest chronione prawami autorskimi.
Kopiowanie bądź rozpowszechnianie tego opracowania lub jakiejkolwiek jego części może spowodować pociągniecie odpowiedzialności cywilnej i karnej w maksymalnym zakresie dopuszczalnym przez prawo.
strona główna wstecz do góry
Olimp Laboratories Nagawczyna 109c 39-200 Dębica, NIP 872-20-76-235 NR KRS 65402 zarejestrowana w Sądzie Rejonowym w Rzeszowie, XII Wydział Gospodarczy Krajowego Rejestru Sądowego, Wysokość kapitału zakładowego 3.898.500 plnrealizacja: ideo